我遇到了这个问题，我尝试在 Python 上导入cv2并收到以下错误消息。
>>> import cv2
Traceback (most recent call last):
File "<stdin>", line 1, in <module>
ImportError: DLL load failed: %1 is not a valid Win32 application.
我确实知道有很多关于此的帖子，其中建议包的位数与 Python 包不同。
但是，我正在运行的所有内容都是 64 位。 我在 Windows 7 64 位上，我有 winpython 2.7.3.3,64 位发行版，我使用此处提供的说明将 OpenCV 编译为 64 位，并将 cv2.pyd DLL 文件放在 Python 解释器的 Lib/site-packages 文件夹中。
不幸的是，使用 Python 的 32 位版本的建议不再适用于我，因为我必须处理对于 32 位来说太大的 NumPy 数组。
唯一缺少的是将新的NumPy二进制文件路径（C：\opencv\build\bin\Release）添加到Windows PATH环境变量中，重新启动Python解释器。
现在一切似乎都正常！
由于引用Win32，ImportError消息有点误导，而问题只是找不到OpenCV DLL。
通过将 OpenCV 二进制文件的路径添加到 Windows PATH 环境变量中解决了此问题（例如，在我的计算机上，此路径是：C：\opencv\build\bin\Release）。
您可以尝试安装32位版本的OpenCV。
我刚刚遇到这个，问题是该软件包曾经安装在每用户软件包目录中。（在视窗上。aka %AppData%\Python.因此，Python首先在那里寻找，找到一个旧的32位版本的.pyd文件，并因列出的错误而失败。不幸的是，pip 卸载本身不足以清理它，此时 pip 10.0.1 似乎没有用于卸载的 --user 参数，仅用于安装。
tl;dr 从 %AppData%\python\python27\site-packages 中删除旧的 .pyd 为我解决了这个问题。
你必须为Windows 64位重建cv2模块。
当 Python 版本混合时，也会出现此错误：
例如，如果要加载的任何DLL文件已使用Python 2.7.16编译，并且您尝试使用Python 2.7.15导入，则会引发错误ImportError: DLL load failed: %1 is not a valid Win32 application.。
这至少是我发现的问题所在。
要做的就是将 cv2.pyd 文件从 x86 文件夹（例如 C：\opencv\build\python\2.7\x86\）复制到 C：\Python27\Lib\site-packages\，而不是从 x64 文件夹中。
我遇到了与之前答案中提到的错误相同的错误，但只有在我使用 pyinstaller 时才会发生。
我在诗歌中做了以下工作：
poetry run python -m pip install pypiwin32
它对我有用。我正在使用
python 3.8.10
pyinstaller 4.7
# Those are the versions that worked for me
pypiwin32 223
pywin32 303
pywin32-ctypes 0.2.0
当我遇到此错误时，在计算机崩溃并重新启动后，它消失了。尝试关闭并重新打开 IDE。如果这不起作用，请尝试重新启动计算机。当我收到此错误时，我刚刚安装了库，没有重新启动 PyCharm。
我从来没有先关闭 PyCharm 进行测试，因为我爆炸的计算机不断随机崩溃......我正在研究那个，但它至少解决了这个问题......小胜利... :)。