运行bowtie2时breseq出错



我最近尝试使用breseq来分析一些细菌测序数据。然而,当breseq使用bowtie2将原始数据与参考基因组比对时,我遇到了一个致命的错误。

以下是我得到的错误的关键部分:
+++ NOW PROCESSING Read alignment to reference genome [system] bowtie2-build -q test_breseq/data/reference.fasta test_breseq/02_reference_alignment/reference [system] bowtie2 -t -p 4 --local -L 31 --ma 1 --mp 3 --np 0 --rdg 2,3 --rfg 2,3 --ignore-quals -k 2000 -i S,1,0.25 --score-min L,0,0.9 --reorder -x test_breseq/02_reference_alignment/reference -U test_breseq/01_sequence_conversion/MRSA_10C.1.converted.fastq -S test_breseq/02_reference_alignment/MRSA_10C.1.stage1.sam --un test_breseq/02_reference_alignment/MRSA_10C.1.stage1.unmatched.fastq Error: the match penalty is greater than 0 (1) but the --score-min function can be less than or equal to zero. Either let the match penalty be 0 or make --score-min always positive. Error: Encountered internal Bowtie 2 exception (#1) Command: /usr/bin/bowtie2-align-s --wrapper basic-0 -t -p 4 --local -L 31 --ma 1 --mp 3 --np 0 --rdg 2,3 --rfg 2,3 --ignore-quals -k 2000 -i S,1,0.25 --score-min L,0,0.9 --reorder -x test_breseq/02_reference_alignment/reference --passthrough -U test_breseq/01_sequence_conversion/MRSA_10C.1.converted.fastq (ERR): bowtie2-align exited with value 1 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!> FATAL ERROR <!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! Error running command: [system] bowtie2 -t -p 4 --local -L 31 --ma 1 --mp 3 --np 0 --rdg 2,3 --rfg 2,3 --ignore-quals -k 2000 -i S,1,0.25 --score-min L,0,0.9 --reorder -x test_breseq/02_reference_alignment/reference -U test_breseq/01_sequence_conversion/MRSA_10C.1.converted.fastq -S test_breseq/02_reference_alignment/MRSA_10C.1.stage1.sam --un test_breseq/02_reference_alignment/MRSA_10C.1.stage1.unmatched.fastq Result code: 256 FILE: libbreseq/common.h LINE: 1384 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

运行bowtie2(samtools,转换FASTQ)之前的所有步骤都正常工作。根据误差,这是因为分数最小函数,该函数的最小分数为0(--score-min L,0,0.9)。当我将函数更改为--score-min L,0.1,0.9(0被0.1替换)时,bowtie2的命令单独起作用。但看起来这部分是在breseq中编码的(不是吗?)。

关于我的问题的更多详细信息:
-运行breseq的命令是:breseq -o OUTPUT_DIR -j 4 -r REFERENCE.fastq RAWDATA.1.FASTQ.GZ RAWDATA.2.FASTQ.GZ
-原始数据类型:MiSeq(150x2)
-bowtie2的版本:2.3.0
breseq的版本:0.29.0
-OS:Linux 16.04 LTS
--测试也得到了类似的错误。

这是个错误还是我用错了?如有任何意见或建议,我将不胜感激。

这是正确的。这个错误是由新的bowtie2版本(2.3.0)中的一个更改引起的,该更改不允许breseq用来调用它的选项。

breseq的下一个版本将更新其选项,以与新的bowtie2兼容。我应该在一两周后发布这个。如果你想从GitHub存储库中构建并使用bowtie 2.3.0,那么这段代码已经被签入了GitHub。或者,您可以暂时将bowtie2的2.2.9版本与当前版本的breseq一起使用。

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