我正在使用limma来分析差异基因表达。为了建模,你需要一个设计和对比矩阵。我只是想知道是否有人有过这样的经历。
假设表达来自野生型(WT)和突变体(M),这些突变体要么是受刺激的(S),要么是未受刺激的(you)。对于野生型我有40个表达式值,对于突变型我有20个表达式值。
所以当我想知道哪些基因在突变型和野生型中反应不同时,我应该使用哪个公式作为对比矩阵:
Diff=(M.S-M.U)-(WT.S-M.U) or Diff=(M.S/20-M.U/20)-(WT.S/40-WT.U/40)
确定突变型和野生型中反应不同的基因的对比可以是:
makeContrasts('WT - M')
,其中M
分别表示受刺激和未受刺激的突变细胞。但是,我怀疑,您可能想要这样的内容:
makeContrasts('WT - M.S', 'WT- M.U')
,这将突出WT和突变细胞之间的变化。